Меню Рубрики

Суммарные антитела igg igm treponema pallidum. Серологическая диагностика сифилиса: как находят антитела к treponema pallidum

Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

Синонимы русские

Суммарные антитела к возбудителю сифилиса (бледной трепонеме), антитела к антигенам Treponema pallidum IgG/IgM.

Синонимы английские

Syphilis IgM, IgG; Treponema pallidum Antibodies, Total; Antibodies to T. pallidum, IgM/IgG, Anti-Treponema pallidum IgG/IgM.

Метод исследования

Иммунохемилюминесцентный анализ.

Какой биоматериал можно использовать для исследования ?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Анализ проводится в целях обнаружения Treponema pallidum (бледной трепонемы) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение. Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Различают несколько стадий сифилиса. Первичная наступает примерно через 2-3 недели после заражения. Одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, появляются, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Зачастую твердый шанкр безболезненный и может оставаться незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Исчезает язва через 4-6 недель.

Вторичный сифилис начинается через 2-8 недель после первого появления твердого шанкра. Эта стадия заболевания характеризуется появлением на коже розеолезно-папулезной сыпи, чаще на ладонях и подошвах. Бывают и другие симптомы, такие как лихорадка, усталость, опухание лимфатических узлов, боль в горле и ломота в теле. Если сифилис не лечить, он может развиваться в скрытой форме, при которой у инфицированного человека не проявляется никаких симптомов, но он продолжает оставаться носителем инфекции. Эта стадия иногда длится годами.

У 15 % больных, которые не лечатся, проявляется поздний, или третичный, сифилис, который может продолжаться несколько лет и в заключение приводить к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам (нейросифилису), болезням сердца и даже к смерти.

Существует несколько методов, которые могут быть использованы для проверки на сифилис. Один из них позволяет определять антитела к T. pallidum в крови. Этот анализ наиболее чувствительный и специфический для обнаружения трепонемных антител на всех стадиях, в том числе и на ранней.

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG.

В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени.

Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum.

После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более.

От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики сифилиса.
  • Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование?

  • При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле.
  • Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи.
  • При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его.
  • Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом).
  • Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: отрицательно.

Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Положительный результат у ранее серонегативного пациента, а также значительный прирост титров в парных сыворотках, взятых с интервалом 7 дней, говорит о первичной инфекции. Обнаружение антител к трепонеме в крови новорождённого помогает подтвердить диагноз «врождённый сифилис».

Кроме того, причиной положительного результата может быть третичный или скрытый сифилис.

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Что может влиять на результат?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности.

Важные замечания

  • Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
  • Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
  • Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
  • При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.
  • Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.
  • Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
  • Treponema pallidum, ДНК [ПЦР]
  • Сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), титр

Кто назначает исследование?

Дерматолог, дерматовенеролог, гинеколог, уролог, инфекционист, терапевт, педиатр.

Антитела к возбудителю сифилиса, суммарные (anti-Treponema Pallidum -суммарные) - это лабораторный анализ крови, который проводится для диагностики сифилиса.
Сроки выполнения 1-3дня
Синонимы (rus) антитела к бледной трепонеме суммарные
Методы иммуно-ферментный анализ
Единицы измерения Нет. Результат либо отрицательный, либо положительный.
Подготовка к исследованию Исследование проводится утром, натощак.
С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов.
Исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала.
Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур.
Тип биоматериала и способы его взятия Забор венозной крови

Спиралевидная бактерия Treponema pallidum относится к семейству Spirochaetaceae и имеет 4 подвида (T. pallidum pallidum, T. pallidum pertenue, T. pallidum carateum, T. pallidum endemicum), первый из которых наиболее распространен и является возбудителем сифилиса. Остальные вызывают такие заболевания, как пинта, фрамбезия, беджель.

После инфицирования организма бактерией иммунной системой начинают вырабатываться антитела, в первую очередь класса IgM . Они могут быть обнаружены у пациента к концу второй недели после заражения. В процессе реактивации инфекции выражено повышаются. Антитела класса IgG начинают вырабатываться через 3 - 4 недели, а на 6-ой они являются доминирующими. Титр данных иммуноглобулинов может сохраняться в крови на протяжении всей жизни. Суммарность антител имеет большое значение при диагностике, т. к. в острой фазе преобладают антитела класса IgM , при хроническом течении заболевания - класса IgG .

Способы передачи и симптомы сифилиса

Источником заражения является инфицированный человек. Согласно статистическим данным в конце ХХ века около 12 миллионов человек являлись носителями бактерии. Преобладающее число заболевших сифилисом находится в развивающихся странах. Основной путь передачи - половой. Treponema pallidum также может передаваться вертикально от матери ребенку, младенец приобретает врожденный сифилис, который приводит к инвалидности. Реже инфицирование происходит бытовым путем, при переливании крови.

Период инкубации может достигать 3 месяцев, но в большинстве случае составляет около 20 дней. Первым симптомом является возникновение безболезненной твердой язвы, называемой шанкром, в диаметре до 3 см. Это первичный сифилис . Вторичный (через 4 - 10 недель) сопровождается увеличением лимфатических узлов , появлением сыпи , ломотой в теле и лихорадкой. Спустя 3 - 6 недель симптомы исчезают, но возможны рецидивы (в 25 % случаев).

Если не принимать меры лечения, то сифилис развивается в скрытой форме . Через 10 - 15 лет у 15 % больных начинает проявляться третичный сифилис , при котором возможно воздействие бактерии Treponema pallidum на любой орган или систему. Сифилис приводит к поражению нервной системы (нейросифилис ), сердца (кардиоваскулярный сифилис ), почек, мозга и т. д. Часто на коже формируются так называемые сифилитические гуммы.

Показания к сдаче анализа на суммарные антитела к возбудителю сифилиса

Исследование суммарных антител к возбудителю сифилиса проводится при:
  • комплексном обследовании для диагностики ИППП;
  • появлении симптомов сифилиса;
  • подготовке к операционному вмешательству;
  • беременности;
  • заготовке донорской крови;
  • диагностике врожденного сифилиса;
  • лечении через определенные промежутки времени.

Методика анализа anti -Treponema Pallidum

Для выявления антител используется иммуноферментный анализ (ИФА). Механизм исследования основан на детекции тест-системой, содержащей синтетические антигены, которые способны связываться с конкретными иммуноглобулинами, комплексов антиген-антитело. Специфичность метода - 100 %, чувствительность - более 95 %.

Интерпретация результатов

Возможны два результата исследования - положительный и отрицательный. Первый свидетельствует о текущем или ранее перенесенном сифилисе. Невыявление антител к Treponema pallidum может также расшифровываться двояко - отсутствие сифилиса или ранняя стадия, при которой иммуноглобулины еще не выработались или их концентрация слишком мала.
Срок проведения анализа: до 4 дней

Treponema pallidum - очень опасная бактерия, возбудитель сифилиса. Она стремительно проникает в человеческий организм и с такой же скоростью в нем размножается, при этом сильно поражая внутренние органы.

Описание бактерии

Трепонема паллидум - бактерия, имеющая клеточную оболочку. Способна жить некоторое время в окружающей среде. Эта бактерия относится к спирохетам. Она выглядит как спираль с мелкими завитками, которых может быть от восьми до двенадцати штук. Как раз по их количеству и форме эта бактерия определяется, когда делается микроскопия мазка.

Этот микроорганизм почти не окрашивается красителями, которые используются в микробиологии. Для того чтобы увидеть бактерию, применяется контрастная микроскопия. Связано это с тем, что оболочка микроорганизма очень тонкая и под воздействием спирта быстро повреждается (а он как раз используется при фиксации окраски). При посеребрении бактерии она приобретает рыже-черный цвет.

Как долго живет бактерия

Treponema pallidum при попадании на предметы (в основном постельное белье и полотенца) сохраняется, пока не высохнет субстрат, в котором она находилась. Чаще всего это слюна, выделяемая жидкость из язв и эрозий, сперма и т. д. При температуре пятьдесят пять градусов бактерия может жить приблизительно пятнадцать минут. При более высокой гибнет значительно быстрее. Во время кипячения бактерия умирает за считаные секунды, то есть практически моментально.

Что губительно для бактерии

Для трепонемы паллидум губительны некоторые среды и вещества:

  • висмут и мышьяк;
  • ртуть;
  • пенициллин;
  • щелочи и кислоты;
  • антисептики и дезинфицирующие растворы;
  • уксус и спирт;
  • УФО и свет.

По данным исследований и экспериментов, проводимых учеными, выяснилось, что эта бактерия иногда может сохраняться некоторое время и в неблагоприятных для нее условиях. Например, в плохой среде, под светом, в высушенном состоянии или при доступе кислорода. Если попадается такой экземпляр микроорганизма, то он может жить в неблагоприятной для него среде до трех лет.

Рост трепонемы и основные антигены

Трепонема паллидум плохо выращивается из-за своей капризности. Клетки куриных эмбрионов и человека для выращивания этого микроорганизма не подходят. Есть два способа, как можно выделить культуру. Первый - заразить бактерией лабораторных кроликов и дождаться развития у этих животных специфического орхита. Второй - трепонему можно вырастить на специальных средах под вазелиновым маслом. Наличие этих микроорганизмов необходимо, чтобы получить антигены, при помощи которых определяется сифилис.

Патогенность трепонемы паллидум

Патогенность бактерии трепонема паллидум имеет свои особенности:

  • благодаря наличию белка адгезина, который взаимодействует с фибронектином слизистых оболочек, обеспечивается «прилипание» к клеткам хозяина;
  • наличие миофибрилл и спиралевидная форма трепонемы паллидум способствуют глубокому проникновению и обуславливают миграцию по организму;
  • антифагоцитарная активность возникает благодаря способности данной бактерии связывать фибронектин;
  • воспаление начинается из-за присутствия липопротеиновых оболочек;
  • трепонема паллидум устойчива к воздействию антибактериальных препаратов из-за изменчивости антигенных свойств и способности образования Л-форм, что приводит к невозможности создать вакцину;
  • эти бактерии способны не только жить в интерстиции, но и размножаться там.

Антитела к бледной трепонеме

Бледные трепонемы в основном собираются на слизистых оболочках. Поэтому с легкостью передаются не только во время полового акта, но и в быту. Чаще всего через полотенца, посуду или поцелуи. К сожалению, человеческий организм не может выработать иммунитет к этим бактериям. Поэтому даже после полного излечения может вновь вернуться.

Для определения заболевания берется кровь на сифилис. У большинства зараженных естьантитела к трепонеме паллидум. При первичном и повторном заболевании - у 88 и 78% больных соответственно. У остальных они или не обнаруживаются, или отсутствуют вовсе. Но отсутствие антител еще не говорит о том, что лечение прошло успешно. На болезни антитела в основном обнаруживаются лишь у 20 процентов больных.

Через 1-2 недели с начала заболевания делается анализ сыворотки. IgM и IgA антитела к трепонема паллидум появляются в сыворотке именно в этот период. В течение периода от полугода до девяти месяцев титры иммуноглобулинов растут, затем начинается снижение их количества. Через время падает ниже определяемых значений и уровень антител. Некоторые не могут передаваться от матери к ребенку.

Антитела IgG появляются через 3-4 недели после заражения сифилисом. А к 6-9 неделе достигают своего пика. Большая концентрация антител сохраняется долго и снижается крайне медленно и только после терапии. А остаточный титр может сохраняться в организме всю жизнь.

Трепонемные антитела могут вырабатываться лишь к трепонеме паллидум. Поэтому при их нахождении можно точно утверждать, что сифилис есть на данный момент или был перенесен ранее.

Симптомы заражения бледной трепонемой

Есть ряд симптомов, указывающих на наличие в человеческом организме трепонемы паллидум. При их появлении необходимо сдать кровь на могут различаться в зависимости от стадии заболевания.

На первой:

  • появляются болезненные язвы с расположенным на слизистой рта, прямой кишки или половых органов;
  • самостоятельно язвы затягиваются как минимум через три недели, процесс может продлиться до полугода.

На второй:

  • на теле появляется сифилитическая симметричная бледная сыпь;
  • головные боли, общее недомогание, повышается температура;
  • увеличиваются лимфатические узлы;
  • иногда могут выпадать волосы, а на гениталиях появляются широкие кондиломы.

На третьей происходит поражение:

  • нервной системы;
  • головного и спинного мозга;
  • внутренних органов;
  • костей.

На первой и второй стадиях эффективно комплексное лечение, включающее в себя антибиотики, физиотерапию, иммуностимуляторы и общеукрепляющие препараты. Но если вовремя не обратиться к врачу, то через несколько лет начинается третья стадия заболевания, вылечить которую бывает практически невозможно.

Как обнаруживается

Для определения, есть ли в организме бактерии, вызывающие сифилис, делается соответствующий анализ. Трепонема паллидум усилиями современной медицины может быть выявлена несколькими способами:

  • На первой стадии сифилиса больной очень заразен и выделяет в окружающий мир множество бактерий. В этом случае применяется микроскопия мазка. Чтобы получить точные результаты, язвы обрабатывают физраствором для смытия мешающей микрофлоры. Потом производится соскоб и изготавливается мазок.
  • Нетрепонемные тесты. Здесь применяются скрининговые методы. Они хороши для первичной диагностики и последующего контроля во время лечения и диспансеризации. Но эти тесты часто дают ложный результат положительный. Трепонема паллидум при этом может в организме отсутствовать. Это происходит потому, что АГ (антитела к антигенам) берутся не возбудителя болезни.
  • Трепонемные тесты применяются именно для выявления трепонемы паллидум. Эти методы используются для подтверждения диагноза и исключения сифилиса при ложном скрининговом тесте.

RPR назначают не только тем, кто обратился к врачу с жалобами, указывающими на возможную инфекцию.

Обнаружение антител к кардиолипину показано:

  • на этапе планирования беременности или после её наступления;
  • перед любой операцией или при поступлении в стационар;
  • при оформлении санитарной книжки.

Все пациенты, у которых обнаружены положительные результаты, будут обследованы более глубоко – при помощи ИФА, РПГА, РИФ или других исследований.

Сифилис – суммарные антитела

Анализ ИФА позволяет определить суммарные антитела к сифилису и установить диагноз. Метод применяется и как скрининговый, и как подтверждающий. Обычно используется качественное исследование.

Это означает, что результат может быть двух видов: положительный или отрицательный. То есть, антитела либо есть, либо их нет.

Наличие антител свидетельствует о том, что человек с высокой долей вероятности болен сифилисом. Отсутствие антител говорит о том, что он здоров.

Количественное определение антитела к сифилису

Более информативным считается количественное исследование крови на антитела к сифилису. Применяется также полуколичественный метод. Отличие состоит в том, что определяется не только сам факт наличия иммуноглобулинов, но также титры антител к сифилису .

Титр – это разведение. Чем он выше, тем активнее инфекция. Например, при проведении РПГА высоким считается титр антител, превышающий 1:640. Такой результат говорит о том, что человек болен. Если же антитела к возбудителю сифилиса присутствуют, но титр менее 1:640, это с высокой вероятностью говорит о перенесенной в прошлом инфекции.

Появление ложных результатов на антитела к сифилису

Далеко не всегда результаты исследования бывают истинными. Именно поэтому для диагностики заболевания проводят два, а иногда и больше разных исследования.

Если анализы показывают, что сифилиса нет, а на самом деле он есть, такие результаты называются ложноотрицательными. Если человек здоров, но обнаружены антитела сифилиса , такие результаты называют ложноположительными.

Наиболее частая причина ложноотрицательных результатов – недостаточный период времени с момента заражения до проведения анализа (когда антитела еще не успели образоваться). Гораздо чаще случаются ложноположительные реакции.

Они могут быть обусловлены такими заболеваниями и состояниями:

  • сопутствующие инфекционные патологии (ВИЧ, гепатиты В или С, ветрянка, ОРВИ);
  • онкопатология;
  • аутоиммунные болезни;
  • инфаркт миокарда;
  • цирроз печени;
  • недавняя вакцинация;
  • беременность.

Есть также множество других причин, почему анализ может быть ложноположительным. При наличии подозрений на неверные результаты требуются дополнительные тесты.

Сроки появления антител к сифилису

Антитела начинают появляться в крови в достаточных для обнаружения количествах не сразу после заражения. Должно пройти несколько недель, прежде чем анализы покажут положительные результаты.

Когда стоит сдавать кровь, зависит от типа применяемой диагностики. Быстрее всего результаты можно получить при помощи ИФА. В этом случае антитела могут определяться уже через 3 недели после инфицирования. К этому моменту может еще не появиться твердый шанкр на половых органах.

Наиболее часто используемый скрининговый метод RPR становится положительным только через 1 месяц после инфицирования. Или через 1-2 недели после появления твердого шанкра.

Еще один часто применяемый диагностический метод, РПГА, не стоит проводить для ранней диагностики сифилиса. Результаты этого анализа могут оставаться отрицательными еще в течение 2 месяцев после передачи инфекции.

Когда исчезают после лечения антитела к сифилису?

Антитела после сифилиса исчезают у разных людей в разные сроки.

В первую очередь это зависит от лечения.

Антитела сифилиса в крови класса М пропадают:

  • в случае лечения на ранней стадии – через 3-6 месяцев;
  • при лечении позднего сифилиса – через год;
  • у нелеченных пациентов – в среднем через полтора года.

Антитела к сифилису после лечения класса G могут циркулировать в крови в течение многих лет.

Иногда они остаются на всю жизнь. Это явление называется «серологическим шрамом».

Где сдать анализ антитела к сифилису?

В нашей клинике вы можете сдать практически любой анализ на антитела.

Сифилис обычно диагностируется изначально при помощи кардиолипинового теста. При положительной реакции используются подтверждающие анализы. Это ИФА или РПГА.

В случае спорных или противоречивых результатов применяются дополнительные исследования.

При необходимости в нашей клинике можно пройти лечение сифилиса в амбулаторных условиях. Его назначит врач-венеролог с большим клиническим опытом.

При подозрении на сифилис обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с 15 летним опытом работы.

Мир микроорганизмов чрезвычайно разнообразен и систематизирован учёными-исследователями. Изучение живого микромира активно велось в прошлом столетии. Однако, многие болезни до конца не изучены и в нынешнем веке.

Так, например, до сих пор не существует единого мнения по поводу происхождения сифилиса. Эта «французская болезнь», как наиболее древнее инфекционное заболевание человечества, по утверждению М. В. Милича, возникла на Земле одновременно с появлением человека.

К слову, М.В. Милич - ведущий сифилидолог страны периода 60-80-х годов, автора многочисленных книг и монографий, посвященных сифилису.

Официально открытие возбудителя сифилиса относится к 1905 году. Немецкие микробиологи Ф. Шаудин и Э. Гофман определили ряд морфологических, культуральных, биохимических свойств бледной трепонемы, а также некоторые особенности данного микроорганизма, положенные в основу таксономии.

В данной статье подробно разберем особенности строения, антигенную структуру, биохимические и физиологические свойства инфекционного агента, вызывающего сифилис.

Итак, единственным возбудителем сифилиса человека является Treponema pallidum (бледная трепонема). Она относится к порядку Spirochaetales типа Spirochaetes.

    Показать всё

    1. Морфология Treponema pallidum

    Клетки бледных трепонем имеют длину 6-15 мкм, ширину 0,1-0,2 мкм, представляют собой протоплазматический цилиндр (цитоплазма, окружённая цитоплазматической мембраной), скрученный в спираль. Иногда клетка микроорганизма напоминает штопорообразную тонкую нить.

    Рисунок 1 - Строение бледной трепонемы. OM, наружная мембрана; Ef (эндофлагелла или периплазматические жгутики); LP 1, 2, липопротеины; Pg - пептидогликан; CM - цитоплазматическая мембрана. (Из Cox DL, Chang P, McDowall AW и Radolf JD: Наружная мембрана, а не оболочка белков хозяина, ограничивает антигенность вирулентной трепонемы паллидум. Infect Immun 60: 1076)

    Число завитков - от 8 до 14 штук. Завитки, одинаковые по размерам, сохраняются при любых движениях клетки, даже при движении трепонемы вдоль или между других клеток, например, форменных элементов крови.

    Рисунок 2 - Электронная микрофотография Treponema pallidum. (From Fitzgerald TJ, Cleveland P, Johnson RC et al: Сканирующая электронная микроскопия Treponema pallidum (штамм Nichols), прикрепленная к культивируемым клеткам млекопитающих. J Bacteriol 130: 1333, 1977.)

    С полюсов клетки, между оболочкой и цитоплазмой располагаются фибриллы. Одна часть фибриллы зафиксирована, вторая часть остаётся свободной. Фибриллы образуют двигательный аппарат трепонемы паллидум, позволяющий осуществлять несколько типов движения в жидкой среде:

    1. 1 Перемещение.
    2. 2 Вращение вдоль оси.
    3. 3 Сгибание.

    Treponema pallidum является грамотрицательным микроорганизмом. Однако, по Грамму не окрашивается, так как имеет в своём составе гидрофобные частицы, не восприимчивые к анилиновым красителям.

    При окраске по Романовскому-Гимзе приобретает слабо – розовый цвет. Эта особенность послужила основанием для видового названия возбудителя сифилиса.

    Treponema pallidum subsp pallidum - это требовательный к условиям окружающей среды микроорганизм, который имеет узкие оптимальные диапазоны pH (7,2-7,4), Eh (-230-240 мВ) и температуру (30-37°C). Трепонемы быстро инактивируются слабым теплом, холодом, высушиванием и большинством дезинфицирующих средств.

    Традиционно трепонемы паллидум считались строгими анаэробами, но теперь они известны как микроаэрофильные бактерии.

    2. Культуральные и биохимические свойства

    Несмотря на интенсивные усилия в течение последних 75 лет, T pallidum pallidum не были успешно культивированы in vitro. Жизнеспособные микроорганизмы могут сохраняться в течение 18-21 дней в комплексных средах, а ограниченная репликация была получена совместным культивированием с клетками культуры ткани. Другие три патогенных вида трепонем также не были успешно выращены in vitro.

    При культивации бледная трепонема теряет свою патогенность, но, тем не менее, сохраняет некоторые антигенные свойства (эту особенность используют для постановки реакции Вассермана).

    Культуру, в основном, культивируют в тестикулах кроликов. В ткани тестикул трепонема паллидум размножается, вызывая орхит у многострадальных животных.

    Размножается Т. pallidum бинарным поперечным делением при температуре около 37˚С. Время генерации in vivo относительно велико (30 часов).

    Трепонемы малоустойчивы во внешней среде.

    1. 1 Вне человеческого организма живут несколько минут, после высыхания погибают. Так, при температуре 40˚С трепонемы погибают в течение нескольких часов, при температуре свыше 50˚С - в течение 15 минут.
    2. 2 При неблагоприятных условиях микроорганизм образует L–формы, а также цисты, которые, в свою очередь, способны, к образованию вновь спиралевидных форм.

    По типу метаболизма Т. pallidum является хемоорганогетеротрофом. Это означает, что в качестве источника энергии для жизнедеятельности бледная трепонема использует органические вещества и энергию химических связей.

    Ввиду неспособности к существованию Т. pallidum in vitro биохимические свойства изучены не достаточно хорошо.

    3. Антигенная структура

    Т. pallidum имеет мало изученную антигенную структуру. Она представлена специфическим термолабильным протеиновым антигеном, неспецифическим липоидным антигеном, а также антигеном полисахаридной природы.

    Проще говоря, антигены бледной трепонемы – это преимущественно белки, липиды и полисахариды наружной мембраны клетки.

    Важную роль играет липополисахарид (ЛПС) клеточной стенки бактерии. Он выполняет антигенную и токсическую функции, являясь эндотоксином бледной трепонемы.

    Липоидный антиген сходен с тканевым экстрактом бычьего сердца – кардиолипином.

    4. Факторы патогенности

    Как и биохимические свойства, факторы патогенности трепонем изучены не достаточно хорошо.

    После попадания в макроорганизм Т. pallidum высвобождает специфические белки, липополипротеины и липополисахариды, проявляющие токсические свойства после ее гибели.

    Липополипротеины участвуют в активации иммунной системы, а протеины сходны по отдельным свойствам с бактериальными гемолизинами.

    К факторам патогенности бледной трепонемы относят способность высвобождать эндотоксины и липидные антигены по все видимости, из липидов митохондриальных мембран, обладающие свойством аутоантигенов.

    Т. pallidum, являясь грамотрицательной бактерией, не продуцирует экзотоксины, однако обладает токсической активностью в отношении некоторых клеток, например, нейробластов.

    5. Виды иммунитета

    В ответ на внедрение возбудителя сифилиса в организм человека возникает клеточный и гуморальный иммунный ответ.

    Клеточный иммунитет связан с фиксацией бледной трепонемы к клеткам органов и тканей и последующей активацией макрофагов, Т-лимфоцитов. При этом из организма человека возбудитель сифилиса не элиминируется.

    Гуморальный иммунитет характеризуется образованием специфических иммуноглобулинов. На ранних этапах инфекции в организме человека образуются IgM. По мере прогрессирования инфекции активируется синтез IgG. IgA синтезируется в малых количествах. Вопросы участия и синтеза IgD и IgE не достаточно хорошо изучены.

    6. Чувствительность к антибактериальным препаратам

    Возбудитель сифилиса чувствителен практически ко всем антибиотикам, но к препаратам выбора относятся пенициллины.

    В основе клеточной стенки бледной трепонемы лежит пептидогликан, выполняющий защитную функцию. Этот пептидогликан является «мишенью» для основного антибактериального препарата, предназначенного для лечения сифилиса – пенициллина. Антибиотики группы пенициллинов разрывают тетрапептидные связи пептидогликана.

    При воздействии антибиотика на растущую бледную трепонему (возможно, при длительном воздействии) образуется L-форма бактерии. Такая форма лишена клеточной стенки, но всё ещё способна к размножению.

    Определение чувствительности бледной трепонемы к антибактериальным препаратам не проводится.

    7. Лабораторная диагностика сифилиса

    Лабораторные методы диагностики сифилиса условно можно разделить на 2 группы:

    1. 1 Выявление самого возбудителя заболевания из биологических препаратов (содержимое шанкра, гнойное отделяемое папул, пунктаты из лимфатических узлов).
    2. 2 Серологические реакции.

    Серологические реакции используются как для верификации диагноза, так и для оценки эффективности терапии сифилиса. Особенность серологии сифилиса сводится к отсутствию положительных результатов анализов на раннем этапе заболевания.

    Объясняется это достаточно просто. Так, инкубационный период сифилиса в среднем составляет 3-5 недель. Было замечено, что у асоциальных лиц, злоупотребляющих спиртным, а также у лиц с туберкулёзом и ВИЧ-инфекцией инкубационный период отличается от средних показателей в сторону уменьшения (2 недели).

    Инкубационный период увеличивается на фоне приёма различных антибактериальных препаратов (до 6 месяцев).

    На протяжении этого времени концентрация антител не успевает достигнуть диагностического титра. Однако, у инфицированного человека могут присутствовать клинические симптомы. Такой сифилис называется серонегативным.

    Серопозитивным называют сифилис с яркой клинической картиной и присутствием в крови диагностического титра антитела (то есть положительный результат серологических реакций). При отсутствии лечения серопозитивный сифилис перетекает во вторичный сифилис, длящийся несколько лет.

    8. Выявление T. pallidum в субстрате

    8.1. Методика исследования Т. pallidum в «тёмном поле»

    Популярным методом диагностики является обнаружение бледной трепонемы в тёмном поле микроскопа. Этот метод позволяет наблюдать за трепонемой, учитывать особенности её морфологии и движения.

    Материал для исследования забирают с твердого шанкра или с эрозий гранулём и папул. Осторожно захватывают предварительно очищенный материал петлей, смешивают с каплей физиологического раствора и наносят на предметное стекло.

    Живой материал изучают в тёмном поле микроскопа. Для этого применяют специальный конденсор, позволяющий изучать трепонему «во всей красе».

    8.2. Микроскопия мазков, окрашенных по Романовскому-Гимзе

    Для исследования фиксированных (сухих) мазков используется метод окрашивания по Романовскому-Гимзе. При таком окрашивании другие виды трепонем приобретают фиолетовый оттенок, а Т. pallidum - бледно-розовый цвет.

    Остальные методы исследования, такие как способ Бури, серебрение по Морозову, простой фуксиновый метод и др., не получили широкого практического применения, ввиду малой информативности.

    9. Серодиагностика

    Выявление антител к бледной трепонеме проводится для:

    1. 1 Подтверждения клинического диагноза сифилиса;
    2. 2 Установления диагноза скрытого сифилиса;
    3. 3 Контроля за эффективностью проводимого лечения;
    4. 4 Подтверждения выздоровления больных сифилисом;
    5. 5 Профилактика сифилиса и диспансеризация населения (исследование крови определённых категорий людей, например, относящихся к группам риска).

    Современные методы серодиагностики основаны на выявлении специфических и неспецифических антител разных классов.

    9.1. Неспецифические серологические реакции

    Лабораторное исследование крови проводится на предмет обнаружения противолипидных антител.

    • Реакция Вассермана (РВ, RW)

    Является классической неспецифической реакцией. В её основе лежит принцип связывания комплемента. Проводится реакция с двумя-тремя антигенами. Исполняется как для количественного, так и для качественного определения неспецифических антител.

    RW ставится с кардиолипиновым и трепонемным антигеном. Последний позволяет повысить специфичность реакции и оценить состояние иммунитета больного.

    При первичном сифилисе RW имеет положительное значение в конце инкубационного периода, т.е. через примерно 4 недели от начала заболевания.

    При исследовании больных вторичным сифилисом положительная RW выявляется у 100% больных и у 75% больных в стадии третичного сифилиса.

    Нередко, RW даёт ложноположительные результаты. Они имеют место быть при следующих физиологических состояниях:

    1. 1 При других инфекциях, вызванных вирусами, бактериями, простейшими;
    2. 2 При злокачественных опухолевых процессах;
    3. 3 При коллагенозах;
    4. 4 При беременности на поздних сроках (после 30 недели) и после родов;
    5. 5 У здоровых лиц, употребляющих спиртные напитки, а также после приёма жирной пищи.
    • Реакции, основанные на агглютинации кардиолипина (MP - RPR, VDRL)

    Эти реакции являются методом экспресс-диагностики сифилиса. По своему существу, это микрореакции, проводимые с плазмой крови (наиболее чувствительный метод) и инактивированной сывороткой (второй по чувствительности).

    Они проводятся капельным способом и требуют использование специального антигена. Этот метод серодиагностики проводится для отбора положительных проб с дальнейшим исследованием лиц с помощью специфических реакций.

    9.2. Специфическая серодиагностика

    В основе диагностики представлены различные методы обнаружения специфических антител.

    9.2.1. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

    Занимает срединное положение из всех специфических методов серодиагностики. Реакция основана на принципах идентификации методом люминесцентной микроскопии флюоресцирующего комплекса, связанного с иммуноглобулином организма человека на поверхности клетки-патогена.

    Флюоресцирующий комплекс состоит из человеческого глобулина и флюоресцеин тиоизоционата. Существует несколько модификаций этой реакции:

    1. 1 Реакция иммунофлюоресценции с адсорбцией;
    2. 2 Реакция IgМ – РИФ с адсорбцией.

    9.2.2. Реакция иммобилизации Treponema pallidum (РИБТ)

    Реакция РИБТ основана на особенности заражённой сыворотки крови людей обездвиживать бледные трепонемы.

    В общих чертах методику можно объяснить так: в кровь больного добавляют антиген, приготовленный из сифиломы кролика и комплемент.

    Иммобилизирующие антитела - это поздние антитела. Своего максимума они достигают к концу первого года болезни. Этот метод не применяется при первичном серонегативном сифилисе, считается наиболее трудоёмким.

    9.2.3. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA)

    Данный метод диагностики автоматизирован. По чувствительности и специфичности сходен с реакцией иммунофлюоресценции с адсорбцией.

    9.2.4. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

    На фоне других серологических исследований, РНГА отличается более высокой чувствительностью и специфичностью, особенно при использовании высококачественного антигена.

    Принцип реакции основан на агглютинации эритроцитов, несущих на своей поверхности антигены бледной трепонемы, если к ним добавить специфические антитела. Результат РПГА будет положительным уже в конце инкубационного периода, т. е. через 3-4 недели.

    Учитывая все особенности возбудителя сифилиса, можно выделить мероприятия, направленные на защиту здорового человека от заражения сифилисом.

    Так как заболевание передаётся половым и контактным (бытовой сифилис) путями, стоит знать, что эффективными способами защиты являются барьерная контрацепция и соблюдение общих правил гигиены.